在生物医疗研究中，如何在体外或体内实验中使用病毒文库时精准确定最佳剂量成为了许多研究人员所困扰的问题。尤其是在慢病毒文库和腺相关病毒(AAV)文库的应用中，确保一个靶点仅进入到一个细胞内是至关重要的。文库实验旨在寻找由单个基因引发的功能变化，因此必须对每个细胞只传递一个靶点的病毒。

在细胞实验中，推荐采用对照病毒进行预实验，以探索最佳的感染效率（MOI，感染倍数），通常建议在MOI达到80%时，文库操作的MOI设置为最佳MOI的三分之一，以显著减少病毒用量，从而控制病毒进入单个细胞的数量。不过，面对难以感染的细胞种类，如免疫细胞，以及在体内实验中，如何确定这一最佳剂量却依然困难重重。因为最佳MOI所能达到的感染效率可能只有30%，如果按1/3的剂量，几乎难以获得成功感染的细胞。

为了帮助研究者更好地进行文库感染的预实验，EVO视讯推出了三色荧光病毒（mTagBFP、Venus、mCherry），这包括慢病毒和AAV两种产品类型。相关研究《Transcriptional linkage analysis within vivo AAV-Perturb-seq》中提供了一种实验方法，验证AAV在低感染复数下是否能感染众多细胞。该研究中，作者制备了25E9、5E9和5E10颗粒数的三种AAV剂量，并通过体内滴定实验探索最佳使用方案。

研究成果表明，经过流式筛选确定了一个较少的剂量，并有效减少了双病毒感染同一细胞的情况。最终选择了5E9的剂量，因为这一剂量能最大化单个AAV感染的细胞数量。通过该病毒构建方案，在CBh启动子的控制下，用于递送和表达mTagBFP、Venus或mCherry，能够更好地进行多种实验的量化分析。

无论是在细胞实验还是动物实验中，EVO视讯的三色荧光病毒均可用于相关的预实验。研究人员可以设置不同剂量梯度进行细胞感染，或进行小鼠体内注射，以研究不同剂量对转染效率和单荧光细胞比例的影响。通过对比，确定单病毒感染比例最高且感染细胞数量最多的剂量作为最佳实验剂量，从而为后续的文库实验提供有力数据支持。

综上所述，埃沃视讯致力于为科研人员提供高效的实验解决方案，助力生物医疗领域的创新与发展。